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  1. 核酸相关服务项目

    1. 基因组DNA及RNA提取

      从新鲜组织、血液、细胞、细菌等多种材料中提取基因组DNA,提取的基因组DNA量因材料种类不同而不同,且差异较大,现就一般材料的基因组DNA提取做归纳。由于技术服务部分客户定制性较高,样品差异度较大,具体价格请来电咨询。

    2. 材料种类样品要求起始量DNA产率RNA产率
      血    液新鲜血液及经抗凝剂处理的全血200 μl4 μg 左右1 μg 左右
      培养细胞细胞悬液或离心收集的细胞1×10710 μg 左 1-10 μg 左右
      细    菌对数生长期的大肠杆菌菌液1 ml6 μg 左右1-10 μg 左右
      动物组织新鲜的常规组织样品30 mg5-20 μg5-50 μg
      植    物新鲜叶片100 mg1-20 μg10-60 μg
    3. 质粒提取

      质粒在分子生物学实验中是不可缺少的工具,我们为您提供各种级别的质粒提取,满足不同的实验需求。

      1. 普通质粒提取:提取产物可满足PCR扩增、测序、限制性酶切和转化等常规实验的需要;
      2. 转染级质粒提取:质粒提取过程中,由于革兰氏阴性细菌自溶或者其他原因的破坏,会从其细胞壁上释放出毒性脂多糖,即内毒素,影响细胞转染的效率。

      实验包括:PCR产物回收、连接转化、克隆鉴定和质粒提取。

      客户需提供甘油保存的菌种或新鲜菌液,并注明菌种和质粒的类型和抗生素抗性。

      最终产品:质粒提取样品,完整实验报告(电泳图及OD值测定结果)。

    4. PCR反应

      客户提供模板(基因组DNA,质粒模板),引物(至少20次50 μl PCR反应用量),请注明扩增产物的用途。

    5. T-PCR反应

      提供提取用材料(组织、细胞等),注明所提材料来源与类型。提供所需基因的引物。我们提供提取的RNA,电泳图片,第一链cDNA产物或PCR产物。

    6. 基因克隆

      将外源基因与克隆载体进行体外连接,转化大肠杆菌,筛选含有目的基因重组质粒的转化子,并将该转化子大量扩增提取重组质粒,这个过程称之为基因克隆。客户需提供新鲜的PCR产物或胶回收产物,并注明PCR扩增所用模板的来源。我们提供给客户三个阳性克隆(不包括阳性克隆的测序)。

    7. 载体构建

      首先,从克隆载体上酶切下目的基因片段,再将目的基因亚克隆至原核表达载体中的过程,称之为载体构建。提供外源DNA片段的来源及载体,载体图谱,抗性要求,并注明酶切位点,我们提供两个阳性克隆,并附PCR鉴定和酶切鉴定结果的图片(不包括阳性克隆的测序)。

 

  1. 蛋白表达及纯化服务

    原核表达系统(Bacteria Expression System)常规蛋白表达的首选系统:具有遗传背景清晰、表达水平高,多种标签选择(HIS/MBP/GST/TRX等)以及菌株稳定等优点。我公司在大肠杆菌表达系统可制备克级以上蛋白。

    1. 蛋白表达及纯化服务(原核表达系统)

    2. 服务编号PPE01PPE02PPE03
      服务内容目的基因亚克隆及鉴定蛋白质表达及常规优化蛋白小量表达及纯化
      最终产品20 μg含目的基因的表达质粒
      项目报告
      1-2个含目的基因的表达菌株
      项目报告
      5-10 mg 纯度≥85%的蛋白
      项目报告
      客户提供5 μg含目的基因的质粒5 μg含目的基因的质粒5 μg含目的基因的质粒
    3. 蛋白表达及纯化服务(哺乳动物细胞表达系统)

      服务编号MPE01MPE02MPE03
      服务内容目的基因亚克隆及鉴定瞬时转染,试表达及纯化稳定表达细胞株建立,
      蛋白小量表达及纯化
      最终产品20 μg含目的基因的
      表达质粒 +项目报告
      50~100 μg蛋白,
      纯度≥85%+ 项目报告
      (Western blot检测结果)
      1~2个细胞株,纯度≥85%的
      蛋白+项目报告
      (Western blot检测结果)
      客户提供5 μg含目的基因的质粒5 μg含目的基因的
      表达质粒,Western 检测
      需提供, 特异性一致
      含目的基因的
      表达质粒,Western 检测
      需提供, 特异性一抗

      哺乳动物细胞表达系统(Mammalian Cells Expression System)表达出的蛋白最接近人体内天然形式,利用我公司自主研发的高效表达系统和筛选报告系统,可以满足不同表达需求,并获得高产量的蛋白和稳定表达的细胞株。

      酵母表达系统(Yeast Expression System)表达量高,蛋白可以分泌到胞外并稳定表达,具有类似高等生物细胞的翻译后修饰功能(如糖基化、脂肪酰化、蛋白磷酸化等)是酵母表达系统的主要优点。我公司的毕赤酵母表达系统可制备克级以上蛋白。

      杆状病毒-昆虫细胞表达系统(Baculoviruses-Insect Expression System)杆状病毒是一种高产量的真核基因表达载体,通过制备表达用病毒侵染昆虫细胞,外源基因产物可以在胞内表达或分泌表达,比如大肠杆菌表达系统更容易获得有正确结构和修饰的活性蛋白。



* 技术服务部分因定制性较高,样品差异度较大,具体价格请来电咨询。