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Strep-Tactin?Superflow Plus (2 ml)

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品 名: Strep-Tactin?Superflow Plus (2 ml)
货 号: 30002
所属类别: 试剂 > 常用生化试剂及试剂盒
供应商: 科邦兴业
品牌: Qiagen
规格/货号:
2 ml30002¥ 询价
适用范围: Strep-Tactin Superflow Plus可用于高效、可重复地纯化至多9 mg Strep-tagged蛋白/ml树脂。纯化得到的蛋白可用于： 功能或相互作用研究 晶体筛选 结构分析 制备抗体

 

用于批量、重力流或FPLC纯化Strep-tagged蛋白
  • 结合能力提高3倍（至多9 mg蛋白/ml树脂）
  • 高度适合于从真核和原核表达系统中纯化蛋白
  • 可在任何液相层析系统上实现自动纯化
  • 几乎不影响蛋白结构、功能和免疫能力
小的Strep-tag II（WSHPQFEK）可用于通过Strep-Tactin树脂纯化有活性、天然构象的高纯度蛋白。此外，结合His标签可以进行标准的两步纯化操作流程。Strep-Tactin可结合磁珠进行小规模纯化操作流程（至多100 μg）或结合Superflow色谱层析树脂进行大规模纯化（至多9 mg/ml树脂）。Strep-Tactin树脂还提供预装柱产品，用于在液相色谱层析体系上进行自动纯化。
Performance

Strep-Tactin Superflow Plus可高效纯化蛋白（参见"Efficient purification of Strep-tagged GFP with Strep-Tactin Superflow Plus"和"Highly specific detection of Strep-tagged proteins in any expression system"）。  

同时，可用pQE TriSystem His·Strep TriSystem Vectors表达带有His-和Strep-tag双标签的蛋白，进行两步纯化操作流程。串联的Ni-NTA和Strep-Tactin纯化步骤标准化且十分快速，可获得超纯度蛋白。

Principle

Strep-tagged蛋白能高亲和力和特异性地结合到由链亲和素工程改造的Strep-Tactin上。漂洗过后，蛋白可由低浓度的生物素（链亲和素的天然配体）或脱硫生物素（稳定、可逆结合的生物素类似物）洗脱下来（参见" Binding of Strep-tagged proteins to Strep-Tactin and elution using desthiobiotin"）。可在原核和真核体系中高效、标准地纯化带有小的Strep-tag II标签蛋白，得到高纯度蛋白。另外，当其他标签可能不适用时，可选用Strep-Tag II体系，例如EDTA等缓冲液添加剂会IMAC柱金属离子脱落。

基质蛋白结合能力
Strep-Tactin Superflow Plus多至9 mg/ml
Strep-Tactin Superflow多至3 mg/ml (~150 nmol@ 20 kDa)
Strep-Tactin Magnetic Beads200-300 μg/ml (10%悬浮液) (~10-15 nmol @ 20 kDa)
Procedure

使用pQE TriSystem Vector表达Strep-tagged蛋白，采用Strep-Tactin Superflow Plus亲和纯化操作流程从细胞裂解液中得到高纯度蛋白。可使用批量或重力流方法纯化Strep-tagged蛋白，或在FPLC兼容柱中装入Strep-Tactin Superflow Plus，可在液相色谱层析系统上纯化。Strep-Tactin Superflow Plus有1 ml和5 ml预装柱两种规格，可在液相色谱层析系统上自动纯化，如FPLC、ÄkTA和BioLogic体系，或使用注射器进行手动纯化。与Strep-Tactin树脂兼容的试剂，参见与Strep-tag Strep-Tactin相互作用兼容的试剂。

与Strep-tag Strep-Tactin相互作用兼容的试剂
非离子去垢剂离子和两性离子去垢剂还原剂其他盐
2% Triton X-1002% N-lauryl sarcosine50 mM DTT25% glycerol 5 M sodium chloride
2% Tween 200.1% SDS  2 M ammonium chloride
2% N-octyl-β-D-glucopyranoside  
 		1.3% N-octyl-2-hydroxy-ethylsulfoxide   1 M calcium chloride 
0.2% N-nonyl-β-D-glucopyranoside0.3% CHAPS    
2% Igepol CA-630 (Nonidet P40)0.1% N-dodecyl-N,N-dimethylamine-N-oxide        1 M guanidine  
0.12% C10E5; decylpentaoxyethylene0.034% DDAO;N-decyl-N,N-dimethylamine-N-oxide1 mM phenylmethyl-sulfonyl fluoride (PMSF)  
0.03% C10 E6 10% ethanol  
0.005% C12 E8    
0.023% C12E9; dodecyl nonooxyethylene (Thesit)    
0.35% DM; decyl-β-D-maltoside    
 0.007% LM; N-dodecyl-β-D-maltoside    

标签位于C端可确保只有全长蛋白被纯化。纯化操作流程具有高度可重复性，确保每次制备都得到同样高品质蛋白。在免疫检测步骤中，可用Strep-tag抗体对Strep-tagged蛋白进行高灵敏度和特异性的检测。

Applications

Strep-Tactin Superflow Plus可用于高效、可重复地纯化至多9 mg Strep-tagged蛋白/ml树脂。纯化得到的蛋白可用于：

功能或相互作用研究
晶体筛选
结构分析
制备抗体

 

 

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