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R.E.A.L. Prep 96 Plasmid Kit (24)

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   电话: 010-88115330 010-53634868 010-68217211   手机: 18611515237 13391766328   Email: sales@kbxy.com.cn

 

品 名: R.E.A.L. Prep 96 Plasmid Kit (24)
货 号: 26173
所属类别: 试剂常用生化试剂及试剂盒
供应商: 科邦兴业
品牌: Qiagen
规格/货号:
24次26173¥ 询价
适用范围: R.E.A.L. Prep 96 Kit可纯化得到即用型质粒DNA,产量和质量特别适合下列应用: 测序 筛选

 

碱裂解法从质粒、柯斯质粒、BAC、PAC和P1中快速获得少量测序级纯DNA

  • 优化操作流程,适合用于纯化质粒、柯斯质粒、BAC、PAC和P1样本
  • 最佳的DNA产量

R.E.A.L. Prep 96 Kits提供96孔板纯化,适用于QIAvac 96或者BioRobot 3000和BioRobot 8000工作站上,纯化获得测序级纯质粒DNA。

 
Principle

R.E.A.L. Prep 96 Kit提供了适用于高通量的自动纯化方法。已成功运用在不同的高拷贝质粒、低拷贝质粒、BAC和E. coli菌株(参见"Plasmids, cosmids, BACs, and bacterial strains used with R.E.A.L. Prep 96")。

R.E.A.L. Prep 96操作流程基于改良的细菌细胞碱裂解,然后通过QIAfilter模块纯化澄清裂解产物,并且通过异丙醇沉淀进一步浓缩DNA。得到的DNA在少量的Tris缓冲液中重悬、待用。所有步骤不需要使用苯酚、氯仿、CsCl和溴化乙锭。

Procedure

R.E.A.L. Prep 96通过结合使用真空和离心,平行成倍处理96个样本(参见"R.E.A.L. Prep 96 procedure")。该程序建立在改良的碱裂解液上,然后使用特殊过滤器QIAfilter 96,进行高效过滤。通常情况下,从1.3 ml LB培养液中至多获得7 µg质粒DNA,或者在TB或者类似的超富集介质中至多获得20 µg质粒DNA。使用优化的BAC方案,可以从2.5 ml细菌培养液中至多隔离出800 ng大质粒DNA。

在多孔环境下生长的培养物通过使用改良的碱裂解方式裂解获得。选择性的加热步骤进一步使得蛋白质和碳水化合物变性和沉淀,然后使用QIAfilter 96孔板真空过滤去除。在过滤物中的DNA可以用异丙醇沉淀收集。

所有样品具有相同的寄主和载体结合时,该操作效果最佳。不同的寄主载体菌结合应该根据不同的介质选择和培养时间进行单独优化。

R.E.A.L. Prep 96 Plasmid Kit提供QIAfilter 96孔板、增长块和其他小规模制备96倍数的质粒或者粘粒DNA的组分。R.E.A.L. Prep 96 Plasmid Kit采用QIAvac 96。采用R.E.A.L. Prep 96操作流程纯化BAC样本需要使用48孔块,为BAC克隆提供优化的培养条件。48孔块不包括在R.E.A.L. Prep 96 Plasmid Kit内。平行处理能够在60–75分钟内纯化96个样品。

Applications

R.E.A.L. Prep 96 Kit可纯化得到即用型质粒DNA,产量和质量特别适合下列应用:

测序 
筛选

 

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