Ultrapure 100 Buffer Set
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| 品 名: |
Ultrapure 100 Buffer Set |
| 货 号: |
11910 |
| 所属类别: |
试剂 > 常用生化试剂及试剂盒 |
| 供应商: |
科邦兴业 |
| 品牌: |
Qiagen |
| 规格/货号: |
|
| 适用范围: |
Ultrapure 100 Buffer Set配合Ultrapure 500 Resin纯化的质粒DNA，其纯度相当于两次CsCl梯度离心所纯化的DNA的纯度。简单的内毒素去除步骤可确保纯化的DNA所含内毒素不超过0.1 EU/µg DNA。纯化的DNA适用于多种敏感的应用，包括：
质粒介导的基因沉默
转染
基因治疗研究 |
用于配合Ultrapure 500 Resin使用的缓冲液组合 Ultrapure 100 Buffer Set是配合Ultrapure 500 Resin使用的缓冲液组合，可轻松高效纯化至多100 mg不含内毒素（<0.1 EU/µg DNA）的质粒DNA。其使用QIAGEN阴离子交换技术，并具有内毒素去除技术，产物DNA纯度很高。 Performance 使用Ultrapure 100 Buffer Set可纯化多至100 mg的不含内毒素的质粒DNA，该系统结合了QIAGEN阴离子交换技术与内毒素去除技术，可用于制备超纯DNA。其卓越的分离性能可确保制备的DNA纯度高，不低于通过连续两轮CsCl梯度离心制备的DNA纯度。 Ultrapure 100 Buffer Set提供的用于交换树脂的缓冲液，经验证其所含内毒素含量均低于10 EU/ml（BioWhittaker Kinetic-QCLTest验证）。 Principle 纯化的质粒DNA中的内毒素污染水平取决于纯化方式。硅胶纯化的DNA表现出极高的内毒素污染水平。使用QIAGEN、QIAfilter和HiSpeed的质粒DNA纯化试剂盒，以及通过两次CsCl超速离心所制备的DNA纯度很高，内毒素污染水平相对较低。QIAGEN Ultrapure 100 system含有内置的内毒素去除步骤，纯化得到的质粒DNA的内毒素含量低于0.1 EU/µg。 内毒素，也被称为脂多糖或LPS，是大肠杆菌等革兰氏阴性菌细胞膜的组成成分之一（参见"Bacterial cell wall"）。在质粒纯化的裂解过程中，内毒素释放出来，对于内毒素敏感的细胞系，可严重降低其转染效率。另外内毒素会与DNA竞争转染试剂，影响质粒DNA的摄取量。内毒素还会诱导巨噬细胞和B细胞等免疫细胞发生非特异性免疫活化反应，导致对转染结果的错误解读，包括诱导合成蛋白质和脂质，如IL-1和前列腺素。总的来说，内毒素在转染反应中是不可控变量，影响反应结果及结果的重复性，使结果难以比较和分析。在基因治疗研究中，内毒素会导致内毒素休克综合症和补体级联反应，影响研究结果。 Procedure 细菌菌体在碱性环境下裂解，并通过离心澄清裂解液（参见" Ultrapure 100 procedure"）。使用专用的Endotoxin Removal Buffer除去内毒素，并将裂解液上载到Ultrapure 500 Resin。 Applications Ultrapure 100 Buffer Set配合Ultrapure 500 Resin纯化的质粒DNA，其纯度相当于两次CsCl梯度离心所纯化的DNA的纯度。简单的内毒素去除步骤可确保纯化的DNA所含内毒素不超过0.1 EU/µg DNA。纯化的DNA适用于多种敏感的应用，包括： - 质粒介导的基因沉默
- 转染
- 基因治疗研究
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